斑马鱼becn1基因的功能研究-

[摘要]:细胞自噬是细胞内要紧的堕落道路经过,细胞的偏袒地,包装袋细胞做成某事偏袒地细胞浆和细胞堕落。、自噬(自噬体的编队),话说回来与溶酶体(lysosome)混合编队自噬溶酶体(autophagolysosome),驳倒包装的目录,发作小的生物分子,如氨基酸,细胞回收使用,细胞器再生与细胞定态。自噬在细胞渴望做成某事效能,细胞团的阻止、容量均衡,使人沮丧地疙瘩,它在监控理财免除等形势发扬着要紧效能。。晚近在眼部青肿,数量庞大的数量庞大的自噬中间定位生殖细胞的细胞质系统性和机构种别性敲除试验证明患有精神病了自噬对胚胎着床前的开展、胚胎对不认识的人的幸存是必不可少的东西的。。越来越多的考虑坐果使知晓,自噬与了细胞的转移。,它在数量庞大的数量庞大的肝脏呕吐的发作中也起着要紧的效能。。Beclin1生殖细胞的细胞质也高程度BECN1生殖细胞的细胞质,哺乳人面兽心的人的的同式发育生殖细胞的细胞质的酵母自噬中间定位生殖细胞的细胞质atg6,该生殖细胞的细胞质就座人染上或粘上体17q21,有12个外显子,在人体整齐的机构中范围广泛的表达,它是哺乳人面兽心的人的自噬发作的根本生殖细胞的细胞质。。Beclin1涂蛋白于的建筑学和效能在东西高尚的守旧的,Beclin1涂蛋白于有四个一组之物要紧担任外场员:BH3(Bcl-2 homolog 3)域、撇旋坠建筑学域(撇线圈) domain/CCD)、退化守旧域(退化) conserved 域/ ECD)和核输入域(NES),支持物几个的自噬中间定位涂蛋白于Beclin1的新手经过这些担任外场员,多涂蛋白于调和的编队,为了一般的和自噬微不足道的的编队我的长大。斑马鱼(Danio Rerio)是东西小型的亚热带摸出,微不足道的鱼秧、轻易喂、开展灵活的、临时旅客性长大、近接触、胚胎开展长大,在生物体外玻璃质。,较强的再生性能等。,考虑机构的开展和再生是一种共有权的模子人面兽心的人。。数量庞大的数量庞大的自噬中间定位生殖细胞的细胞质,如Atg1、已开展。,atg3,atg4,atg5,becn1,atg7,atg9,ambra1,atg12,atg14和atg16在斑马鱼金中都在同式发育生殖细胞的细胞质,其涂蛋白于质建筑学与人体高尚的类似于。,而斑马鱼的优点也使其译成考虑自噬效能和机制的良好测定生物。晚近相当任务使用MOs在斑马鱼中考虑自噬,要求能抖搂自噬在斑马鱼开展和器官再生做成某事效能,根究自噬在病菌传染恢复做成某事效能,细胞先天的免除和得到性免除的效能。2012年以后TALEN和CRISPR/Cas9生殖细胞的细胞质敲除技术在斑马鱼中成的运用,极大地装饰了斑马鱼的考虑中数和考虑担任外场员,也译成斑马鱼中考虑自噬的无力器。本考虑使用CRISPR/Cas9技术在斑马鱼中敲除自噬中间定位生殖细胞的细胞质becn1,摇身一变异种结构,用来细查becn1在斑马鱼胚胎开展做成某事效能,异乎寻常地对斑马鱼肝脏开展及效能的碰撞。朕运用CRISPR/Cas9技术在斑马鱼中成地敲更becn1生殖细胞的细胞质,得到了不变的遗传摇身一变异种。。6dpf垄断,两者都的形成开展无明显的区分。,这使知晓becn1对斑马鱼胚胎期的开展能够挑剔绝对必要的的,固然不克不及开除摇身一变对考虑到CE的碰撞。。在7 ~ 8dpf,四摇身一变异种肝脏明显的骄傲,是野生人面兽心的人的两倍多。,PH3染上或粘上显示肝细胞肥沃的增生。P62涂蛋白于摇身一变异种的肝,泛素涂蛋白于和涂蛋白于质总计的肥沃的吹捧,细胞核种别性标志涂蛋白于程度也吹捧cox4i1 SIG,阐明细胞内自噬编队受阻。,涂蛋白于质总计的和细胞核的特别基金管理机构。Western 剖析坐果使知晓,内质网中间定位涂蛋白于CHOP,Bip,的明显吹捧,并造成内质网应激。在9 ~ 10dpf,四摇身一变异种亡故。同时,朕也使用CRISPR/Cas9技术在斑马鱼中成地结构了自噬中间定位生殖细胞的细胞质atg7和atg5的摇身一变异种,初步坐果使知晓,这些摇身一变异种的胚胎开展是,但13dpf和26dpf出生的后根本上都死了,亡故前亡故引起及机构细胞和器官的转换。本考虑经过CRISPR/Cas9技术在斑马鱼中成结构了三个自噬中间定位生殖细胞的细胞质becn1,的ATG5和ATG7生殖细胞的细胞质摇身一变异种的不变,鉴于斑马鱼近接触,灵活的开展的加标点于,制止了哺乳人面兽心的人的中系统性敲除这些生殖细胞的细胞质造成胚胎开展前段或出生的在短时间内便亡故的坐果,深一层的考虑自噬在开展做成某事开展、细胞区别对待阻止、细胞的生理效能及其对疙瘩的效能弥补了东西良好的E。。

[程度赋予单位]:东北学会
[度]:硕士
[赋予当年的程度]:2016
[花色品种号]:Q78

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